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DAPI染色液适用于普通细胞和组织的细胞核染色。DAPI2-(4-amidinophenyl)-6-indologuanidinedihydrochloride,alsoknownasDAPIdihydrochloride.分子式为c16h15n5.2hcl，分子量为350.25。能穿透细胞膜的蓝色荧光染料，与双链DNA结合，能产生比DAPI本身强20多倍的荧光，灵敏度比EB还高。

DAPI染色常用于检测细胞凋亡。染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI在某些特定情况下也常用于普通细胞核染色和双链DNA染色。DAPI的最大激发波长为340nm。最大发射波长为488nm。当DAPI与双链DNA结合时，最大激发波长为364nm，最大发射波长为454nm。DAPI染色液可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色，也可根据具体实验要求使用。，稀释至相应浓度并染色。一般推荐的工作浓度为0.5ug~10ug/ml。

详见拜博生物：

OGD模型，即OGD离体脑缺血模型

。

缺氧缺糖(OGD)模型：

该方法可以模拟在体脑缺血模型，也称为离体缺血模型。我们有一个美国公司生产的三气培养箱。通过直接引入N2，精确控制培养箱中CO2和O2的浓度，同时剥夺神经元培养液中的糖分，从而为培养的神经元创造缺氧缺糖的环境，模拟体内脑缺血的情况。实验如下

目的：探索一种简单、稳定、可重复的体外制备成年大鼠神经干细胞氧糖剥夺/复氧模型的方法。方法：以成年Fisher344大鼠海马神经干细胞系为研究对象。在无血清培养基中培养并传代，通过巢蛋白和DAPI免疫荧光双重染色证实其生物学特性。

将三气体培养箱中的氧浓度调节至1%以制备缺氧环境，并将培养基改为Earle'不含葡萄糖的平衡盐溶液。分别在缺氧和缺糖2小时、4小时、6小时、8小时和10小时后取出细胞。

恢复正常条件继续培养24h后，倒置显微镜下观察细胞形态变化，CCK-8比色法检测细胞存活率，流式细胞仪检测细胞凋亡率。。同时设立正常氧、正常糖的正常对照组。结果：与正常对照组相比，缺氧缺糖组细胞吸光度明显增加，细胞存活率有所提高，但差异无统计学意义(P>0.05).

随着缺氧缺糖时间的延长，神经干细胞的形态学损伤逐渐加重，细胞吸光度值逐渐降低。缺氧缺糖6小时后，与正常对照组相比，差异有统计学意义(P<0.05).

缺氧缺糖6小时后，细胞存活率明显低于正常对照组，差异有统计学意义(P<0.05).神经干细胞凋亡率逐渐增加，明显高于正常对照组(P<0.05).其中缺氧缺糖6h后细胞凋亡率达50%以上。

结论：利用三气培养箱中的物理缺氧方法，可以成功建立一种简单有效的神经干细胞体外氧糖剥夺/复氧模型。

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